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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

股動(dòng)脈是下肢動(dòng)脈的主干，由髂外動(dòng)脈延續(xù)而來(lái)。在腹股溝韌帶中點(diǎn)的深面入股三角。在股三角內(nèi)，股動(dòng)脈先位于股靜脈的外側(cè)，逐漸從外側(cè)跨到股靜脈的前方，下行入收肌管，再穿收肌腱裂孔至腘窩，易名腘動(dòng)脈。

股動(dòng)脈在腹股溝中點(diǎn)處位置表淺，可摸到搏動(dòng)，是臨床上急救壓迫止血和進(jìn)行穿刺的部位。股動(dòng)脈動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞組成了動(dòng)脈內(nèi)壁，并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下，分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長(zhǎng)。

主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來(lái)控制和精確調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究?jī)?nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理，動(dòng)脈粥樣化等的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的方法。

細(xì)胞特性：

1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常股動(dòng)脈組織。

2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF 原代 內(nèi)皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

LZM測(cè)試盒帶標(biāo)準(zhǔn) 30管/28樣 比濁法

大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)elisa檢測(cè)試劑盒

蔗糖磷酸化酶測(cè)試盒

人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 elisa分析檢測(cè)試劑盒

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶4F3B（LEUKOTRINE B4）

體液L－乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒

犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析檢測(cè)試劑盒

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa檢測(cè)試劑盒

衰變加速因子CD55抗體 CD55

絲/蘇蛋白激酶SIK3抗體 SIK3

PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD38單克隆抗體 mouse CD38/PE-Cy5

PE標(biāo)記人CD23單克隆抗體 human CD23/PE

組蛋白去乙酰化酶4重組兔單克隆抗體 HDAC4

17β羥基類固醇脫氫酶12/17β-HSD12抗體 HSD17B12

紅色熒光蛋白單克隆抗體 RFP

環(huán)指蛋白62抗體 RNF62/MKRN2

鋅指蛋白924抗體 ZBTB41

五肽抗體 TP-5/Thymopentin

促黃體素β亞單位重組兔單克隆抗體 LHB

蛋亞砜還原酶B2抗體 MSRB2

Endokinin-C抗體 Endokinin-C

FAM198B蛋白抗體 FAM198B

磷酸化糖原合酶激酶3α抗體 Phospho-GSK3A (Ser21)

卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 Bestrophin 4

組織SPHK激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒（510）

MAPK/ERK激酶3重組兔單克隆抗體

MEKK3

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框123抗體

兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞C1orf123