① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人頰黏膜成纖維細(xì)胞

英文名稱：Primary human buccal mucosa fibroblasts

組織來源：頰黏膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介：

頰黏膜位于上、下牙的咬合部位，是口腔黏膜的一個(gè)特定區(qū)，通常為口腔和上喉分泌保濕劑和潤滑劑。

頰粘膜的組織結(jié)構(gòu)與唇黏膜相似，固有層結(jié)締組織致密，黏膜下層較厚。頰粘膜通過黏膜下層附著再頰肌上，具有一定張力，在咀嚼肌肥大和黏膜增厚的情況下，頰白線增厚，彌漫性水腫和腫脹，有時(shí)變紅，延伸至近牙齒。

細(xì)胞特性：

1）細(xì)胞來源于人正常頰黏膜組織。

2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長方式：長梭形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

大鼠羧肽酶A1(CPA1)檢測試劑盒 ，英文名： CPA1 ELISA Kit

Mouse glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒

ratadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHK(HumanHexokinase)ELISAKit人己糖激酶

細(xì)胞PRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit6-keto-PGF1a大鼠6同前列腺素F1a

EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 Protein

Adipo R1(adiponectin receptor 1 0.5mgAdipo R1(adiponectin receptor 1) 脂聯(lián)素受體-1(抗原)

IDO1重組人 IDO1 / IDO 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Adipo R1(adiponectin receptor 1 0.5mgAdipo R1(adiponectin receptor 1) 脂聯(lián)素受體-1(抗原)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 Protein

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IDO1重組人 IDO1 / IDO 蛋白 Protein

小鼠高密度脂蛋白(HDL)檢測試劑盒

Human leptin (LEP) ELISA Kit 人瘦素(LEP)檢測試劑盒

HumanleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 人白三烯E4(LTE4)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMAB檢測試劑盒人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測試劑盒

植物性食物樣品處理試劑盒20次

humanansfusionansmittedvirus,TTVELISAKit人輸血傳播病毒/辛型肝病毒((TTV)檢測試劑盒

人頰黏膜成纖維細(xì)胞小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠apelin12(AP12)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用