細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

下列是產(chǎn)品的訂購信息：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

湖貝堿甲 CAS 98243-57-3 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢

醇雜質(zhì)Ⅲ CAS  規(guī)格：50mg 訂購|咨詢

;Allicin CAS 539-86-6 規(guī)格：0.5ml 訂購|咨詢

油酸甲酯 CAS 112-62-9 規(guī)格：HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢

草素 CAS 73-03-0 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢

順式 CAS  規(guī)格：30mg 訂購|咨詢

去氫鉤藤堿 CAS 630-94-4 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢

L-羥 CAS 51-35-4 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢

左旋咪唑 CAS  規(guī)格：50mg 訂購|咨詢

絡(luò)塞定 CAS 100462-37-1 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢

扁塑藤素;pristimerin CAS 1258-84-0 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢

MHCC97-L細(xì)胞，人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞供應(yīng)商磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 英文名稱：Phospho-Paxillin (Tyr118) 0.1ml

/激酶蛋白Pim1抗體 英文名稱：PIM1 0.2ml

磷酸化前病毒整合位點蛋白1抗體 英文名稱：Phospho-PIM1(Tyr218) 0.1ml

肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體 英文名稱：Pin1 0.1ml

磷酸化肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體 英文名稱：Phospho-Pin1 (Ser16) 0.1ml

磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗體 英文名稱：phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 0.1ml

磷酸化孕激素受體抗體 英文名稱：Phospho-Progesterone Receptor(Ser190) 0.1ml

磷酸化蛋白磷酸酶2A（PP2Aα）抗體 英文名稱：phospho-PP2A alpha (Tyr307) 0.1ml

/蛋白激酶5抗體 英文名稱：PLK5 0.2ml

蛋白激酶Cα相互作用蛋白1抗體 英文名稱：PICK1 0.1ml

磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 英文名稱：PID1 0.2ml