產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：5(6)-CFDA, SE

產(chǎn)品中文名稱：5(6)-CFDA, SE

規(guī)格：5mg/50 mg

貨號：EY-01X8568
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

•  λEX/λEm: 494/521。（pH=7）

產(chǎn)品形式白色或淺黃色固體

使用中注意事項•  可溶于DMSO。

保存建議:-20℃，避光保存12個月。

運輸條件:藍冰運輸

背景

5(6)-CFDA, SE是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞示蹤染料，不僅可用于細胞增殖的體外實驗，還可用于追蹤細胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein

IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)

C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)檢測試劑盒

Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenHeatShockProtein20,HSP-20檢測試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血管緊張素原(aGT)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒 ，英文名： BMP-4 ELISA Kit

Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)檢測試劑盒

2型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素

體液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitE犬雌激素

5(6)-CFDA, SECNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein

玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)

PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

(四)誘導(dǎo)表達

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。