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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IL-33 protein

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠白介素-33（IL-33）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100μg

貨號：EY-01X8618
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

分子:IL-33,IL-33

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于：鼠源 IL-33 亞型（Q8BVZ5）（ Ser109-Ile266）表達(dá)的蛋白片段。

蛋白長度：重組小鼠IL-33由159個氨基酸（N-Met）組成，預(yù)測分子量為17.7 kDa。 在還原性條件下的SDS-PAGE中，重組小鼠IL-33的分子量約為17 kDa。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

采用 LAL 法檢測，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 0.1。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干動?動

背景

白細(xì)胞介素-33 (IL-33)，也稱為DVS27或NF-HEV(來自高內(nèi)皮細(xì)胞的核因子)，是IL-1家族的促炎蛋白和染色質(zhì)相關(guān)細(xì)胞因子，與IL-1和IL-18具有高度的序列:和結(jié)構(gòu)相似性。IL-33蛋白在人扁桃體、派爾集合淋巴結(jié)和淋巴結(jié)中被高內(nèi)皮微靜脈內(nèi)皮細(xì)胞高度而選擇性地表達(dá)。IL-33蛋白具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性，研究表明IL-33是一種具有雙重功能的蛋白，可能同時充當(dāng)細(xì)胞因子和細(xì)胞內(nèi)核因子。作為一種2型細(xì)胞因子，IL-33蛋白在蠕蟲感染和反應(yīng)性疾病中也起著關(guān)鍵作用。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADM重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)檢測試劑盒

HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 人前膠原C端肽酶(PCP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor26SPSM(Human26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶體

飲料甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次

MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

心血管活性多肽   英文名稱：   Apelin   規(guī)格：      英文縮寫：   AP

轉(zhuǎn)錄因子AP-1   英文名稱：   anscription Factors AP-1   規(guī)格：      英文縮寫：   AP-1

0酸化AKT蛋白   英文名稱：   phosphorylation AKT   規(guī)格：      英文縮寫：   p-AKT

晚期糖基化終末產(chǎn)物   英文名稱：   advanced glycosylation end products   規(guī)格：      英文縮寫：   A動?動

大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)檢測試劑盒 ，英文名： HDL2 ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 豬白介素1β (IL-1β)檢測試劑盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHB(RatMethemoglobin,MHB)ELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白

體液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitPCK牛0酸烯醇式同酸羧激酶

重組小鼠白介素-33（IL-33）OSM重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

白介素3(IL3)重組蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)

SRI重組人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

CLEC5A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白