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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Rat G-CSF Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）

規(guī)格：10 μg/50 μg/500 μg

貨號：EY-01X8668
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:大鼠

序列:氨基酸序列來源于：大鼠源G-CSF(P97712)（Ile22-Ile214），在N端有6 X His標(biāo)簽表達(dá)的蛋白片段。

活性:通過其誘導(dǎo)M-NFS-60細(xì)胞增殖的能力來測定。該效應(yīng)的ED50為4.802 ng/mL。

蛋白長度：重組大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子120由193個氨基酸組成，預(yù)測分子質(zhì)量為 21.3 kDa。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

采用 LAL 法檢測，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 0.1。

產(chǎn)品形式:凍干動?動

背景

G-CSF 是一種造血生長因子，可控制粒細(xì)胞的生成、分化和功能，并增強(qiáng)成熟末端細(xì)胞的功能活性:。已發(fā)現(xiàn) G-CSF 基因有三種轉(zhuǎn)錄變體，編碼三種不同的亞型。粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞集落刺激因子是一種細(xì)胞因子，通過控制血液中兩種相關(guān)白細(xì)胞群（粒細(xì)胞和單核-巨噬細(xì)胞）的產(chǎn)生、分化和功能，在造血過程中發(fā)揮作用。G-CSF 在臨床上用于促進(jìn)骨髓移植后的造血功能恢復(fù)。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)

FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白

POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein

CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白

XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein

小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)檢測試劑盒

Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit 人(PK)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCA檢測試劑盒人抗釀酒酵母抗體(ASCA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

Humanypsinogen-2,y-ⅡELISAKit人原Ⅱ(y-Ⅱ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠雄激素受體(AR)檢測試劑盒 ，英文名： AR ELISA Kit

Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)檢測試劑盒

MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠組織因子(TF)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹傷寒抗體

細(xì)胞ERK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1

重組大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein

Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)

XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein

FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白

CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。