產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human GDNF Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號：EY-01X8715
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

序列:氨基酸序列來源于：人源 GDNF (Ser78-Ile211) (P39905) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長度：重組人GDNF 由134個(gè)氨基酸組成，預(yù)測分子量為15.1 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

通過LAL法測定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris, 50 mM NaCl, pH8.5.

基因ID:2668

使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推動?動

背景

GDNF is a disulfide-linked, homodimeric neurotrophic factor structurally related to Artemin, Neurturin and Persephin. These proteins belong to the cysteine-knot superfamily of growth factors that assume stable dimeric protein structures. GDNF signals through a multicomponent receptor system, composed of a RET and one of the four GFRα (α1-α4)receptors. GDNF specifically promotes dopamine uptake and survival, and morphological differentiation of midbrain neurons. Using a Parkinson’s disease mouse model, GDNF has been shown to improve conditions such as bradykinesia, rigidity, and postural instability. The functional human GDNF ligand is a disulfide-linked homodimer consisting of two 15 kDa polypeptide chains called monomers. Each monomer contains seven conserved cysteine residues, including Cys-101, which is used for inter-chain disulfide bridging, and others that are involved in the intramolecular ring formation known as the cysteine-knot configuration.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta 0.5mgCCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細(xì)胞性蛋白1β抗原

FKBP3 Protein Human 重組人 FKBP3 / FKBP25 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

BTC重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

UBE2G1重組人 UBE2G1 蛋白 Protein

小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)檢測試劑盒

HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbasicfetoprotein,BFP檢測試劑盒人堿性胎兒蛋白(BFP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脂肪酸合成酶(fattyacidsyhase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumaetanusAibodyELISAKit人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠血清(NO)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠特異性免疫球蛋白E（sIgE）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠P0蛋白(p0)檢測試劑盒 ，英文名： p0 ELISA Kit

Mouse dopamine D1 receptor (D1R) ELISA Kit 小鼠多巴胺D1受體(D1R)檢測試劑盒

ELISA 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIFI16/p16(Humanierferon-inducibleprotein16)ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16

通用型沙眼衣原體(Chlamydia)試劑盒20次

ELISAKitFE大鼠鐵蛋白

重組人膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）BTC重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta 0.5mgCCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細(xì)胞性蛋白1β抗原

UBE2G1重組人 UBE2G1 蛋白 Protein

FKBP3 Protein Human 重組人 FKBP3 / FKBP25 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。