① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人心臟微血管內(nèi)皮細胞

英文名稱：Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells

組織來源：心臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人心臟微血管內(nèi)皮分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。

公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

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兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒   兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細胞間粘附分子1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒   兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性血管細胞粘附分子1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T

People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三0酸(DP)試劑盒

HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降鈣素(CT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancarcinoembryonicaign,CEA試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組腺病毒效價比色法定量試劑盒50次

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規(guī)格：96T/48T

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein

Thymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1)

OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein

GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白

LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白

Thymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1)

GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein

LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白

OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein

人心臟微血管內(nèi)皮細胞大鼠軟骨糖蛋白39(GP39)試劑盒 ，英文名： GP39 ELISA Kit

Mouse bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒

RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 大鼠脫輕表雄酮(DHEA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHAELISAKit大鼠透明質(zhì)酸

細胞半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用