① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔腦膜細胞

英文名稱：Rabbit Meningeal Cells

組織來源：腦膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。

實驗室分離的兔腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腦膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

兔(rabbit NO)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔合酶(rabbit NOS)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔神經(jīng)元烯醇化酶(rabbit NSE)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮(DHT)試劑盒

HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancholinephosphoglyceride,PC/CPG試劑盒人0酸甘油酯(PC/CPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

總膽汁酸(TBA)定量試劑盒20次

HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受體B(SRB/CD36)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EFNA5重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MMP-20(matrix metalloproteinase 20 0.5mgMMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原

MAP2K2重組人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 標簽) Protein

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白

CSF1R Protein Mouse 重組小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 標簽)

MMP-20(matrix metalloproteinase 20 0.5mgMMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白

EFNA5重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CSF1R Protein Mouse 重組小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 標簽)

MAP2K2重組人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 標簽) Protein

兔腦膜細胞大鼠克拉拉細胞蛋白16(CC16)試劑盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit

Mouse apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒

RatAzidothymidine,AZTELISAKit 大鼠(AZT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFSP(HumanFibroblastsurfaceprotein)ELISAKit人纖維母細胞表面抗原

細胞還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次

Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用