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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔皮脂腺分離自皮脂腺組織；皮脂腺是由腺泡與短的導(dǎo)管構(gòu)成的全漿分泌腺，皮脂腺導(dǎo)管開口于毛囊。除手外的其余部位皮膚中均有皮脂腺，前額、鼻、背上部的皮脂腺多，稱為皮脂溢出部位。其余的部位比較少，掌、足趾及足背沒有皮脂腺。皮脂腺大多位于毛囊及立毛肌之間，由一個(gè)或幾個(gè)囊狀的腺泡與一個(gè)共同的短導(dǎo)管構(gòu)成。分泌部呈囊泡狀，由多層腺細(xì)胞構(gòu)成。腺泡周邊緊貼基膜的細(xì)胞較小，呈扁平或立方形，稱為基細(xì)胞。新生的腺細(xì)胞不斷向中心移動(dòng)，體積增加，胞質(zhì)內(nèi)的小脂滴越來越多，腺泡中心的細(xì)胞更大，細(xì)胞核固縮、細(xì)胞器消失，胞質(zhì)內(nèi)充滿脂滴。后腺細(xì)胞解體并與脂滴同時(shí)排出，即為皮脂。皮脂腺的分泌因人種、年齡、性別及氣候等因素而不同。10歲以前分泌力弱，16～35歲分泌旺盛，老年期減弱；夏天分泌旺盛，秋冬季分泌較少；過食油膩、辛辣刺激的食物以及按摩也可增加分泌。皮脂腺分泌旺盛，可導(dǎo)致皮膚油膩、皮膚粗糙、毛孔粗大，容易發(fā)生粉刺及脂溢性皮炎。皮脂腺，分泌皮脂過少，可導(dǎo)致皮膚干燥、脫屑、皮膚老化等，所以控制皮脂腺的分泌很關(guān)鍵。皮脂腺的活動(dòng)也與多種皮膚疾病相關(guān)，例如: 皮脂腺數(shù)量或其活動(dòng)的減少可能會(huì)導(dǎo)致皮膚干燥綜合征，特應(yīng)性皮炎是皮膚屏障功能障礙的炎癥性疾病，研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病與皮脂腺功能減弱有關(guān) ，毛周角化病的皮損中則沒有皮脂腺。而皮脂分泌過多和尋常痤瘡相關(guān)。同時(shí)現(xiàn)有研究分析結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)特征， 嘗試探索皮脂腺與皮脂腺腫瘤發(fā)生的聯(lián)系。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮脂腺采用聯(lián)合機(jī)械分離制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔皮脂腺經(jīng)CK4免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔皮脂腺體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒

Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人(VD)檢測(cè)試劑盒

Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit 人抗抗體(AsAb)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanChlamydiaachomatis,CT檢測(cè)試劑盒人沙眼衣原體(CT)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米T25品系試劑盒20次

Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor,SLPIELISAKit人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

豚鼠黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LH ELISA Kit

Human apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測(cè)試劑盒

MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit 猴白介素6(IL-6)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF-6ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6

細(xì)菌乳糖酵解酚紅瓊脂平板50個(gè)

RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit兔子白介素2(IL-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔皮脂腺細(xì)胞人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit

人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。