① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞

英文名稱：Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠骨髓來源巨噬分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源巨噬采用分離骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

大鼠腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)檢測試劑盒 ，英文名： TNFSF12 ELISA Kit

Mouse soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)檢測試劑盒

Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanImmunoglobulinG,IgGELISAKitG

微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)服務(wù)1個樣本

ELISAKitMDC/CCL22大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子

C5重組人 Complement C5a 蛋白 Protein

角蛋白4(KRT4)重組蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)

PLA2G2D重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CSH1 Protein Human 重組人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

角蛋白4(KRT4)重組蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)

CSH1 Protein Human 重組人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白

C5重組人 Complement C5a 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

PLA2G2D重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor III (F III) ELISA Kit 人Ⅲ(FⅢ)檢測試劑盒

HumanGliadinIgAELISAKit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human15-lipoxygenase,15-LO/LOX檢測試劑盒人15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin3,AQP-3ELISAKit小鼠水通道蛋白3(AQP-3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子 -1 (mouse sICAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠干擾素 - a (mouse IFN- a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   72T   美國 R&D

小鼠干擾素 - g (mouse IFN- g )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國 Diaclone

小鼠免疫球蛋白 E (mouse IgE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 ADI

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用