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產品名稱:小鼠精原干細胞

產品特點:小鼠精原干細胞公司正在出售的產品人心臟微血管內皮細胞RNAHCMEC miRNA5 μg SK-N-BE(2)人神經母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino =

產品型號:

更新日期:2024-12-16

訪問次數:374

小鼠精原干細胞的詳細資料:

小鼠精原干細胞

實驗報告:

小鼠精原干細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

小鼠精原干細胞

小鼠精原干分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞,是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些優勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節機制的深入研究,精子發生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染,異體、異種移植技術的實際應用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養。在哺乳動睪丸內,精子發生時一個受高度調控和持續的過程,精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數量,另一方面又不斷執行分化成各級生精細胞直至后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物精子發生的原始細胞,也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養體系的建立,在生物學、醫學、畜牧業生產及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

產品名稱

小鼠精原干細胞

組織來源

睪丸組織

英文名稱

Mouse   Spermatogonial Stem Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

小鼠精原干細胞

公司實驗室分離的小鼠精原干采用先機械吹打、后消化,結合Percoll密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠精原干經CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

小鼠精原干細胞

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 球形

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠精原干細胞

注意事項:

小鼠精原干細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
小鼠精原干細胞

大鼠白介素15(IL-15)檢測試劑盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit

Mouse pyruvate kinase (PK) ELISA Kit 小鼠酸激酶(PK)檢測試劑盒

ELISA 小鼠抑制素B(mouse Inhibin B)  進口分裝

CLIAKitforIL-2R(MouseIerleukin-2receptor)ELISAkit小鼠白介素2受體

通用型離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒50

ELISAKitN-AChR大鼠型乙酰受體

CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein

FoxP1(Forkhead box P1 0.5mgFoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原

MICA重組人 MICA 蛋白 Protein

CST9L Protein Human 重組人 CST9L / Testatin 蛋白 (Fc 標簽)

EPHA6 Protein Mouse 重組小鼠 EphA6 / EHK-2 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

FoxP1(Forkhead box P1 0.5mgFoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原

CST9L Protein Human 重組人 CST9L / Testatin 蛋白 (Fc 標簽)

CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein

EPHA6 Protein Mouse 重組小鼠 EphA6 / EHK-2 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

MICA重組人 MICA 蛋白 Protein

小鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human spleen tyrosine kinase (Syk) ELISA Kit 人脾臟酪激酶(Syk)檢測試劑盒

HumanATP-bindingcassetteanspoerA1,ABCA1ELISAKit 人腺苷三0酸結合 96T/48T 進口分裝

HumanADisiegrinAndMetalloprotease10,ADAM10檢測試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)檢測試劑盒規格:96T/48T

正常男性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測試劑盒規格:96T/48T

小鼠精原干細胞小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗心肌抗體(AMA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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