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① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：小鼠視網膜微血管周細胞

英文名稱：Mouse Retinal Microvascular Pericyte Cells

組織來源：視網膜組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠視網膜微血管周分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網膜血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。周細胞（pericyte）又稱Rouget細胞和壁細胞，是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞，可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊，監視和穩定內皮細胞的成熟過程。此外，周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點之一，所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細胞連接，包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控；毛細血管受損時，周細胞還可增殖，分化為內皮細胞和成纖維細胞。

公司實驗室分離的小鼠視網膜微血管周采用-膠原酶聯合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠視網膜微血管周經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右；

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

小鼠B6(VB6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA 試劑盒 96T/48T

The human influenza virus aibody IgG (FLU) ELISA Kit 人流感病毒抗體IgG(FLU)試劑盒

HumanProteinZELISAKit 人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPH試劑盒雞腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞P27蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousefractalkine/CX3CL1ELISAKit小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)試劑盒規格：96T/48T

CD14重組人 CD14 蛋白 (Fc 標簽) Protein

醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白 Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)

CNKSR3重組人 MAGI1 / CNKSR3 蛋白 (GST 標簽) Protein

CEACAM8 Protein Human 重組人 CEACAM8 / CD66b 蛋白

NP Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)

醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白 Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)

CEACAM8 Protein Human 重組人 CEACAM8 / CD66b 蛋白

CD14重組人 CD14 蛋白 (Fc 標簽) Protein

NP Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)

CNKSR3重組人 MAGI1 / CNKSR3 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠視網膜微血管周細胞大鼠丁酰酯酶(BCHE)試劑盒 ，英文名： BCHE ELISA Kit

One two D dimer (D2D) ELISA Kit 人D二聚體(D2D)試劑盒

Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforD1R(MouseDopamineD1receptor)ELISAKit小鼠多巴胺D1受體

細胞色素P450亞酶2C19(S-MEPHENYTOIN)活性高效液相色譜法(HPLC)定量試劑盒20次

Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKit大鼠膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)試劑盒規格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用