細胞簡介：

輸卵管位于人體的盆腔內，一般的人有兩條，左、右輸卵管各位于一側。它們由底外側角部向外，平行伸展，先達卵巢的端，再沿卵巢系膜緣上行至卵巢的輸卵管端，且呈弓形而覆蓋于卵巢上，然后向下、向內行，終止于卵巢的游離緣及其內側面上部。

粘膜層的上皮為單層高柱狀細胞所構成，上皮細胞可分為 4種不同類型：纖毛細胞、分泌細胞、楔形細胞和未分化細胞。輸卵管是卵子運輸、儲存、獲能，以及卵母細胞采取、運送、成熟、受精和早期胚胎發育的重要場所。輸卵管上皮細胞體外培養可以用于飼養層細胞，與胚胎共培養，克服胚胎的發育阻滯現象。

因此，體外培養輸卵管上皮細胞，不但可以進一步了解影響生殖微環境變化的因素，而且還可以建立輸卵管上皮細胞與胚胎共培養體系，研究輸卵管上皮細胞對胚胎體外發育的影響。

細胞特性：

1）細胞來源于人正常輸卵管組織。

2)細胞鑒定：細胞角蛋白-17（CK-17）熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 Delf原代上皮細胞培養體系 作為體外培養的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)檢測試劑盒 ，英文名： W5A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)檢測試劑盒

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Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗復合物(TAT)檢測試劑盒

HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大內皮素(BigET)檢測試劑盒 進口分裝

HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2檢測試劑盒人腺苷三0酸結合盒轉運體G2(ABCG2)檢測試劑盒

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HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)檢測試劑盒

人輸卵管上皮細胞C（VC）檢測   Vitamin B2 (VB2) detection

B1（VB1）檢測   The total amino acid (TAA) detection

B2（VB2）檢測   Detection of malic dehydrogenase

總基酸（T－AA）檢測   Hydroxyproline sample preeatme

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。